卵质熟了没 纺锤体观测告诉你

卵子内的纺锤体一如人体心臟一样,外观看不见却扮演著最重要的角色...送子鸟依经验整理出适合观测纺锤体族群
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2020-05-08 2020-05-08
作者 送子鸟生殖中心

显微镜底下,胚胎师聚精会神挑选活动力与型态兼具的那个他(精虫),接著将万中选一的这隻精虫注射入卵子内的卵质中,过程中会将第一极体放置于12点鐘方向,以避开卵子那看不见得心臟-纺锤体(spindle);纺锤体由微小管(Microtubule)、中心体(Centrosome)、染色体所组成,在细胞分裂过程中其负责牵引著在中间排列整齐的染色体往两极化移动,外国文献指出纺锤体并不总是位于极体的正下方,约3成的卵子其纺锤体会有偏移的状况,所以在常规作业模式中就可能受到伤害,进而导致染色体异常或影响胚胎发育,一如人体心臟一样,外观看不见却扮演著最重要的角色。

2019生殖医学年会上,他院团队分享了其统计结果如下:

  • 2018.09~2019.05
  • 31位自卵客户(31个週期)
  • 114颗MII熟卵
  • 于取得卵子后4-6小时观察其纺锤体
  • 以第一极体為中心定义其左右各45度為A区,其余為B区

研究团队发现:

  1. 在取得卵子后4-6小时观察其纺锤体,有75%的卵子皆可以顺利观察到,且以40岁為界并无年龄上的差异
  2. 大部分(81.4%)的卵子其纺锤体位于第一极体下方,但仍有18.6%的可能性,卵子其纺锤体会发生偏移未落在第一极体的下方
  3. 相较于<40岁的族群,≥40岁的族群中(下方图示及表格),落在B区的机率较高(27.8% v.s. 16.9%)

  <40岁 ≥40岁
週期数 20 11
成熟卵子数(MII) 86 24
有看见纺锤体 75.6% (65/84) 75% (18/24)
未见纺锤体 24.4% (21/86) 25% (6/24)
纺锤体位在A区 83.1% (54/65) 72.2% (13/18)
纺锤体位在B区 16.9% (11/65) 27.8% (5/18)

另以培养结果来看,收案共45个客户(226颗MII)比较其进行显微注射前有无确认纺锤体位置,其受精及分裂结果是否有差异...结果发现与上方结果同样无统计差异,但在≥40岁的组别其受精率有较高的趋势,且在Day3分裂率可达到100%。

  有确认纺锤体位置 无确认纺锤体位置(假设于第一极体正下方 P-value

受精率 (正常受精数/熟卵数)

总合(不分龄) 72.8% (78/107) 71.4% (85/119) NS
<40岁 72.6% (61/84) 71.4% (75/105) NS
≥40岁 73.9% (17/23) 71.4% (10/14) NS
分裂率 (有分裂的胚胎数/正常受精数)
总合(不分龄) 6.2% (75/78) 94.1% (80/85) NS
<40岁 95.1% (58/61) 94.7% (71/75) NS
≥40岁 100% (17/17) 90% (9/10) NS

送子鸟于2017年初引进纺锤体的辨识影像设备,用于确认卵子成熟阶段 ,因刚吐出第一极体后的卵子,需再往下进程2~3小时才能至最佳受精时间的第二次减数分裂的中期(Metaphase II),利用纺锤体的观测可避开外观看起来成熟(已吐出极体),但卵质仍处在第一次减数分裂后期(telophase)或第二次减数分裂前期(prophase)等不成熟状态的卵子,藉此胚胎师能更精准掌握受精时间,或针对冷冻卵子的族群,避免在telophase阶段(纺锤体仍架在卵质与第一集体中间)时进行冷冻,因為在冷冻过程中的脱水皱缩可能造成纺锤体的断裂损伤。 

                            

也用于受精时纺锤体位置的定位,因 卵巢功能衰退或高龄客户因卵数少或精虫状况不理想的族群,通常胚胎师会选择使用显微注射的方式,藉由偏光显微镜的观测就避免显微受精时误伤卵子内的纺锤体;另外就文献中提到或上述团队统计的结果来看,高龄患者确实有较高的纺锤体偏移现象(会落在一般未观测时的常规入针范围内),因此更建议使用偏光显微镜辨识纺锤体位置,以把握每一週期珍贵的卵子,我们也发现在使用解冻卵子进行受精的情况下,因卵子经过冷冻解冻(皱缩、回涨)过程影响 ,纺锤体位置多有所偏移。有了此技术,让胚胎师们在操作时能更加精准的掌握受精时间与入针位置,期望為客户的每一颗卵子发挥最大价值。

*医疗行為需与医师讨论进行,本篇文章仅反映当时治疗状况与建议

评论

送子鸟生殖中心
送子鸟生殖中心
  1. 纺锤体的重要性在近年来的生殖医学年会都有许多讨论,但大部分团队的研究都著重在纺锤体的位置,担心在显微注射时破坏纺锤体,故探讨有无观测纺锤体是否影响后续胚胎的发育,答案几乎都是不影响。因為观测纺锤体观察到位置偏移的比例约占3成以内,且卵子是圆的,若要打中纺锤体的机会又更小了。
     
  2. 那為什么送子鸟会有不同的发现呢?认為纺锤体可以用来观测卵子是否卵质 (内在) 与外观 (外在) 都成熟了,最大的原因是在送子鸟是尊重生命,以客為尊。大部分的生殖中心在取完卵后会将成熟的卵子继续受精,而未成熟的卵子将之丢弃,但在送子鸟,未成熟的卵子会继续培养至取卵当天下午4点,若后续有成熟,还是可以使用。那為何其他生殖中心不做呢?因為后续才成熟的卵子(纺锤体呈现Telophase的情况多)效益低,通常无法成為好囊胚。送子鸟秉持的能為客户获得更多胚胎的机会也要去做的心态,故将这些卵子观测纺锤体,获得的宝贵经验。如下图:当卵子刚从不成熟卵子形成成熟卵子(排出第二极体)时,这时的纺锤体还停留在telophase,需经过2-4小时不等,纺锤体才会变成Metaphase II,此时才是适合受精的好时机。※註:Metaphase II相较于Telophase有较高受精率与囊胚率。
  3. 依据文献 Telophase Normal Spindle
    受精率 46% 66%
    正常囊胚率 13.5%  30.8%
  4. 观测纺锤体不是能让怀孕率大跃进,但秉持著能多一点囊胚机会,就是离生下健康宝宝更进一步,我们就会去做!故送子鸟依经验整理出适合观测纺锤体族群如下:
  • 高龄
  • 卵子成熟率<60%
  • 解冻卵子
  • 当週期冷冻卵子数<=5颗