
卵子是非常精细的细胞,玻璃化冻解卵过程中,必须维持渗透压、温度控制良好,才能使卵子的细胞膜、纺锤体 、细胞骨架以及胞器(如:粒线体)的伤害降到最低。除此之外,在卵子取出后最合适的时间冷冻,也可以避免伤害纺锤体,提升解冻卵子成绩。在卵子冷冻逐渐盛行的今日,冻卵技术的要求也更精益求精,无论是操作方式、时间、针对不同卵子的个别化冷冻,都是胚胎师们亟欲知道的「撇步」。
2019台湾生殖医学会中, 一间生殖中心 团队统计了2018年6月~2019年2月共63位解冻卵子
客户的成绩,分别探讨以下主题对于解冻成绩的影响:
1. 卵子年龄
2. 破卵针注射~卵子冷冻间隔时间
3. 冷冻平衡过程卵子外观变化
4. 冷冻平衡时间长短
卵子年龄
63位客户之总解卵数為463颗,如表一所示,依照卵子年龄分為三组,发现三组的解冻存活
率相当,无统计差异。
表一、不同年龄族群之解卵存活率
|
年龄 |
解卵颗数 |
存活颗数 |
存活率(%) |
p 值 |
|
总数 |
463 |
445 |
96.11 |
无差异 |
|
<38 |
67 |
66 |
98.51 |
无差异 |
|
38~40 |
169 |
164 |
97.04 |
无差异 |
|
41~47 |
227 |
215 |
94.71 |
无差异 |
破卵针注射~卵子冷冻间隔时间
依照注射破卵针到卵子冷冻的间隔时间分為四组:<38小时、38~39小时、>39小时、以及体
外成熟(IVM)卵子,发现取出时即成熟之卵子(MII)在不同时间区间冷冻下,存活率没有差别,落在
97~100%之间;而取出时观察未成熟,于后续体外培养才成熟之卵子(IVM)的存活率,则下降為
71.43%。
图二、不同破卵针后间隔时间之解冻存活率

冷冻平衡过程卵子外观变化
冷冻过程中平衡步骤目的在于将高渗透压之冷冻保护剂与卵子细胞内水分强迫交换,避免超
高速降温过程中细胞内水分生成冰晶,进而伤害卵子,影响解冻存活率。当卵子一进入高渗透压
之冷冻保护剂时,会产生皱缩,观察皱缩现象略分為如图三显示之A(球形皱缩)、B(角度皱
缩)、C(不规则皱缩)三种,过去研究推测,A现象之卵子品质较好、B现象次之、C现象最差。
但统计后续解冻存活率,三种现象间并无明显差异(表四),可能需再探讨其他参数。
图三、冷冻平衡时卵子外观变化

表四、不同卵子外观变化之解冻存活率
|
卵子外观 |
A |
B |
C |
|
存活率(%) |
95.00 |
96.10 |
96.89 |
冷冻平衡时间长短
平衡过程可藉由观察卵子皱缩又回胀的状况,来判断水分是否交换完成,若胀回表示已平衡
完成,则可进行下一步脱水、冷冻。标准回胀时间為12~15分鐘,不同卵子恢复时间不同,依据回
胀时间分為三组,发现三组之解冻存活率也没有统计上差异。
图三、不同冷冻平衡时间之解冻存活率

正好于2019年5月之ASPIRE(亚太生殖医学大会),送子鸟也发表类似主题,结果略為不同,
研究当GnRH為破卵针时,冷冻卵子时间对于解卵培养成绩及怀孕结果是否有影响,回溯统计
2017.10~2018.10期间,396卵子库借卵週期,共7224颗解冻卵子。其中3313颗卵子為破卵针后
38小时冷冻,3911颗卵子為破卵针后40小时冷冻。
如下图,破卵针后38小时冷冻之卵子,培养结果的成绩皆稍高,尤其存活率及好囊胚率达统
计意义。

进一步统计两组卵子之怀孕结果,怀孕率及著床率均无差异,显示不论冷冻间隔為何,后续
只要发育為好囊胚,可具相同怀孕潜力。

冻卵是送子鸟对客户最重要的承诺,因此在每次操作时无不战战兢兢谨慎以对,针对高龄、
卵少或成熟度较差的客户,冷冻前会特别观察纺锤体,避开可能造成伤害的状况,如同专业厨师
于烹饪前须先了解所有食材状况,调整刀工、火候及入菜时间,我们也希望尽所能掌握每颗卵的
最佳冷冻时间,帮求子夫妻创造最大效益。









