胚胎植入（Embryo transfer）的挑选不外乎从观察形态及分裂速率著手。然而有文献指出，在动物模式中，胚胎分裂速度较快的胚胎通常是雄性的（Avery et al, 1991）。1995年Tarin等人在人类生殖期刊（Human Reproduction）发表的文章中，也从人类胚胎观察到此现象的存在。同年，Ray等人发现，在体外培养至同一时期，雄性胚胎比雌性胚胎在分裂速度和代谢活性均要来得快，且此现象会持续至植入之前。
因為培养液的不断改良，使得胚胎在体外培养至囊胚期（Blastocyst）可以得到较好的品质。现今的趋势，培养至囊胚期再植入，不但可以使著床率提高，也因為可减少胚胎植入的数目，而降低多胞胎的风险。
囊胚期胚胎大约在受精后培养至第五天会形成（120~124 小时），植入条件的选择主要為形态的观察，包括了囊胚腔扩张的程度（Expansion of blastocoel）、内细胞团（Inner cell mass: ICM）及滋养层细胞（Trophectoderm：TE cells）的细胞排列。
若细胞分裂速度较快的有较大的机率是雄性胚胎，那么，在第五天观察到形态良好的囊胚期胚胎是不是雄性胚胎占了较大的比率呢？或者是说，是不是以目前选择囊胚期胚胎的条件更倾向于选择到雄性胚胎？因此，為了找出解答，Luna等人在纽约的生殖中心统计了 2003 年八月至 2005 年八月，共计 937 个IVF生产记錄及 1284 位成功产下的胎儿，分析第三天植入和囊胚期植入胎儿性别的比率。
材料与方法
囊胚期分级方法（修改自Gardner and Schoolcraft classification）：
（a）依囊胚腔扩张的程度及孵化程度（Hatching status）分级
- 囊胚腔的大小小于整体胚胎一半的早期囊胚
- 囊胚腔的大小等于或大于整体胚胎一半的囊胚
- 囊胚腔完全占据囊胚的体积
- 扩张的囊胚期囊胚腔的大小大于早期胚胎体积，且透明带（Zona pellucida）较薄
- 正在孵化的囊胚，其滋养层细胞开始脱出至透明带层外面
- 已孵化的囊胚，完全脱出至透明带外面
（b）以（a）3~6 级再以内细胞团（ICM）区分
- 很多细胞紧紧相连
- 多个细胞，成群但较鬆散
- 少数细胞，排列鬆散
- 很少细胞，排列不规则，且细胞大小不均
（c）以（a）3~6 级再以滋养层细胞（TE cells）区分
- 很多细胞构成一层，排列规则，互相连结
- 少数细胞构成一层，排列较鬆散
- 很少细胞，且细胞较大
- 更少细胞，且细胞大小不一
将第 3 天植入和第 5 天囊胚期植入成功生产的胎儿根据性别做统计比较，另外也统计了卵子受赠与自用卵子在第3天植入与第5天植入成功生产之胎儿其男女性别的比例。
结果
在全数共 937 次生产，有 1284 位胎儿诞生，其中第 3 天植入的女：男比例显然高过于第 5 天植入的女：男比例（48.8%：51.2% vs 42.3%：57.7%）。
若以总数 603 个单胞胎来看，第 3 天植入為男生的比例占 51.5%，而第5天植入為男生的比例占 63.7%；从多胞胎角度来看，全数共334次生产，有 681 位胎儿诞生，其第3天植入与第 5 天植入為男生的比例则没有明显差别（50.9%：52.8% ）。
在自用卵子所生产的 1060 位胎儿中，第5天植入為男生的比例也较第3天植入来得高（58.3%：51.2%）；在受赠卵子方面，也发现具有相同的趋势，但唯取样数不足，在统计学上无法相比较。
作者进一步去分析囊胚期胚胎的分级标准是否会造成挑选到的雄性胚胎机率上升？从 100% 著床率生产的 74 位男婴和 57 位女婴经回溯性分析，雌性胚胎在内细胞团和扩张程度的分级较雄性胚胎略胜一筹；而雄性胚胎则是在滋养层细胞的分级领先著雌性胚胎。但由统计学的角度来看，事实上是没有显著差异的。
讨论
- 早期有许多类似的研究，比较胚胎分裂速度及第三天和第五天植入对于生男生女的比例影响，都发现生男的机会较生女的机率高，不过以统计学上的分析，是没有显著差异的。
- Anderson 等人在 2001 年也发表了第三天和第五天植入，男女性别比例的报告，并未发现有性别比例失衡的现象；并且也推测挑选胚胎的条件及观察内细胞团和滋养层细胞的形态在性别比例上可能有一些影响。
- 本篇為第一个探讨囊胚期植入经回溯性分析在统计学上有明显性别差异的研究报告，其中单胞胎个案更是明显有男女比例上的不同。
- 进一步探讨囊胚期形态和内细胞团及滋养层细胞的分级在性别比例上的影响，结果没有显著差异。然而从单胞胎个案的结果，作者认為挑选到完全扩张的囊胚（Most fully expanded blastocyst）是造成雄性胚胎比率上升的因素。
- 挑选好胚胎植入為的是增加著床的机会，然而在本篇研究中却也造成男女比例失衡的现象；除了往后在挑选囊胚期胚胎的分级标准做些修改外（尤其是针对准备进行单一囊胚植入术的个案），作者希望将来能经由延长培养（Extented culture）来了解雄性和雌性胚胎在形成囊胚的过程中相异之处（Early differences in sexual dimorphism）。
参考资料
- Luna et al. Blastocyst embryo transfer is associated with a sex-ratio imbalance in favor of male offspring. Fertility and Sterility. 2007 Vol. 87. p519~523.
